Какво можем да научим от мишите модели на аутизъм

[email protected]
1 февруари 2018 г.

1. Въведение

Аутизмът е сложно невроразвиващо разстройство, чиято честота нараства драстично през последните две десетилетия, в крак с драстичното нарастване на употребата на глифозат (активната съставка в широко разпространения хербицид Roundup) върху основните хранителни култури [1, 2]. Въпреки че корелацията не означава непременно причинно-следствена връзка, съществуват множество механизми, чрез които нарушаването на глифозата в човешката биология и биологията на чревния микробиом може да причини много от наблюдаваните симптоми и биологични показатели, свързани с аутизма [3, 4].

Забележително е, че мишките могат да придобият синдром, който много прилича на човешкия аутизъм, а изследователите са успели да създадат множество породи „дизайнерски мишки“, които показват аутистични социално-комуникативни дефицити. Тези щамове на мишките се оказаха много полезни, за да ни помогнат да разберем патологията на човешкия аутизъм, въпреки че картографирането не е перфектно. Един такъв щам е естествено срещащ се инбреден щам, известен като BTBR T+tf/J мишки (накратко BTBR) [5, 6]. Друг модел на мишка е генериран чрез излагане на мозъка на язовир на мишка на токсичен химикал, имитиращ вирусна инфекция по време на бременността, и това е довело до изразяване на аутистично поведение при много от малките [7, 8, 17]. В това, което е може би най-изненадващият експеримент поради своята специфичност, изследователите са успели да създадат аутизъм при мишки, просто като елиминират способността на мозъка им да произвежда важна биологична молекула, наречена хепаран сулфат, като инактивира, само в мозъка, ген, който кодира специфичен ензим, който е от съществено значение за неговия синтез [9]. Тази манипулация е направена при раждането. Авторите пишат в статията: „Забележително е, че тези мутантни мишки рекапитулират почти целия спектър от аутистични симптоми, включително нарушения в социалното взаимодействие, изразяване на стереотипно, повтарящо се поведение и увреждания при ултразвукова вокализация“. Много от уникалните характеристики, които се появяват в тези модели мишки, особено по отношение на нарушаването на чревните микроби, имат паралели сред децата аутисти.

Глифозатът се използва широко в селското стопанство, както върху генетично модифицирани Roundup-Ready култури, така и върху други основни култури, като пшеница и захарна тръстика, като сушител непосредствено преди прибиране на реколтата. Нашите хранителни запаси са силно замърсени с глифозат и толкова много деца в Америка са изложени ежедневно на този токсичен химикал. Последният брой, идващ от Центровете за контрол на заболяванията за нивата на аутизъм в САЩ, е едно от всеки 36 деца към 2017 г., което е по-високо от всяка предходна година.

2. Хепаран сулфат и мозъчните вентрикули

Фактът, че манипулация, толкова специфична за хепаран сулфат в мозъка, е достатъчна, за да предизвика аутизъм при мишки, предполага, че мозъчният дефицит на хепаран сулфат може да бъде ключова централна патология при човешкия аутизъм. Всъщност много генетични мутации, свързани с аутизма, включват ензими, свързани със синтеза на така наречения извънклетъчен матрикс [10]. Това е неклетъчният компонент на тъканите и органите, който не само осигурява физическо скеле, но също така инициира и организира много биомеханични и биохимични сигнали, които управляват клетъчните физиологични реакции на стимулантите от околната среда [11]. Редица мутации, свързани с човешкия аутизъм, се срещат в набор от гени, наречени “гликогени”, които кодират протеините и липидите, които са свързани с хепаран сулфат в матрицата, образувайки “хепаран сулфат протеогликани” (HSPG) или ензими участва в “гликозилиране” – свързването на хепаран сулфат и подобни сложни молекули на захарната верига с тези протеини и липиди [10].

Мозъчните вентрикули са мрежа от кухини в средата на мозъка, пълни с цереброспинална течност. Хепаран сулфатът (HS) е виден във вентрикулите, намиращ се в структури, наречени „фрактони“, изграждащи нишата на стволовите клетки, която инициира неврогенезата [12]. Под ръководството на HSPG в тези специализирани зони на извънклетъчен матрикс стволовите клетки се размножават и диференцират в специализирани клетки и мигрират в мозъка, за да заменят увредените неврони. Изследвания върху мишки показват, че нарушаването на ензим, който е от съществено значение за синтеза на HS в ранните етапи на развитие на миши ембриони, води до сериозни нарушения на развитието на мозъка [13].

По-рано споменах за самородната BTBR порода мишки, които са били задълбочено изследвани поради техния аутистичен профил [5, 6, 14]. Подобно на мишките с нарушен синтез на HS в мозъка, тези BTBR мишки също показват дефицит на HS в мозъка [14]. Морфологичното развитие на мозъка изглежда нормално, с голямото изключение, че му липсва мозолистото тяло, дебела лента от нервни влакна, която свързва лявата и дясната страна на мозъка и образува покрив над вентрикулите. Състои се от плътно опаковани следи от бяло вещество, състоящи се от големи аксони, обвити в големи количества миелинова обвивка. Установено е, че и децата с аутизъм имат необичайно бяло вещество в миелиновата обвивка на мозъка, което също е изчерпано във водното съдържание [15]. Забележително е, че някои хора се раждат без корпус или с намален размер и някои от тях могат да функционират отлично в обществото. Проучване обаче установи, че близо половината от децата с този дефект имат черти на аутизъм [16].

3. BTBR мишки: проблеми с червата

Основно проучване върху тези BTBR мишки разкрива специфични нарушения в червата, за които се предполага, че водят до неврологични ефекти чрез взаимодействия по оста на червата и мозъка [18]. Най-яркото наблюдавано разстройство е нарушение в синтеза на жлъчни киселини в черния дроб и по-нататъшното им модифициране от чревните бактерии. Обикновено черният дроб синтезира жлъчни киселини от холестерола и ги конюгира с таурин или глицин, преди да ги транспортира до червата или да ги буферира в жлъчния мехур. Отговорността на специфични видове чревни бактерии, главно Бифидобактерии, е да деконюгират конюгираните жлъчни киселини, освобождавайки молекулата на таурина или глицина за по-нататъшен метаболизъм. Това е необходима стъпка, преди жлъчните киселини да бъдат допълнително модифицирани от други чревни бактерии, по-специално от вида Блаутия, във вторични жлъчни киселини. По този начин има много различни варианти на жлъчните киселини и различните форми имат различни сигнални ефекти, влияещи върху перисталтиката и целостта на чревната бариера.

Установено е, че тези BTBR мишки имат дефицит в синтеза на жлъчна киселина в черния дроб, както и допълнителен дефицит в тяхното деконюгация и превръщането им във вторични жлъчни киселини от микробиотата. Това беше в съответствие с наблюдаваното значително намаляване на популациите на Бифидобактерии и Блаутия.

4. Глифозатът причинява ли аутизъм при BTBR мишки?

Лесно е да се твърди, че тези отклонения могат да се дължат отчасти на експозицията на глифозат. Тези мишки са потомството на множество поколения инбредни лабораторни мишки, които почти сигурно са били хранени със стабилна диета с глифозат в мишките си, произведени от генетично модифицирани култури и соя от Roundup-Ready. Намаленото снабдяване с жлъчни киселини във всяко поколение и директната токсичност на глифозат за определени видове бактерии биха променили микробното разпределение с течение на времето. По този начин чревните микроби, които се предават от поколение на поколение, могат да поддържат патологично разпределение, повлияно от глифозат, действащ като антибиотик и ензимен разрушител [19].

Синтезът на жлъчната киселина в решаваща степен зависи от ензимите на цитохром Р450 (CYP) в черния дроб. Доказано е, че глифозатът силно намалява експресията на CYP ензима в черния дроб на плъх [19, 20]. Изследване върху птичи микробиоти показва, че бифидобактериите са особено силно чувствителни към глифозат в сравнение с всички други изследвани видове [21]. Логично е бифидобактериите да страдат от излагане на глифозат поради ролята им в деконюгиращите жлъчни киселини, тъй като може да се очаква глифозатът да замести глицина по време на етапа на конюгация, поради факта, че той е аминокиселинен аналог на глицин [22, 23 ]. Бифидобактериите ще имат задачата да деконюгират глифозата от жлъчните киселини и след това ще бъдат директно изложени на освободената молекула глифозат.

BTBR мишките също показаха нарушен синтез на серотонин, което доведе до забавена перисталтика и проблеми със запек и свръхрастеж на тънкочревни бактерии (SIBO). Това също е лесно обяснимо с глифозат, тъй като той нарушава синтеза на ароматните аминокиселини по шикиматния път [19]. Чревните микроби произвеждат тези незаменими аминокиселини, за да ги доставят на гостоприемника, а един от тях, триптофанът, е предшественикът на серотонина. Освен това, BTBR мишките са имали намалени нива на ацетат в червата, късоверижна мастна киселина, която обикновено се произвежда от чревните микроби, особено Бифидобактерии [24], по време на храносмилането на мазнини и важно гориво, което се подава в цикъла на Krebs за производство на енергия. Дефицитът на ацетат в червата се наблюдава и при човешкия аутизъм и това е свързано с дефицит на бифидобактерии [25].

5. Изследвания върху мишки, изложени на глифозат

Излагането на мъжки мишки на хербициди на основата на глифозат по време на юношеския и възрастния период доведе до значително намаляване на нивата на серотонин в няколко ядра в мозъчния ствол [26]. Това е свързано със загуба на тегло, намалена двигателна активност и увеличаване на тревожното и депресивно поведение. Серотонинът, независимо дали се произвежда в мозъка или червата, се сулфатира транзитно, а мелатонинът, който се получава от серотонин, също се сулфатира. Ние твърдим в статия, публикувана през 2015 г., че глифозатът може да си сътрудничи с алуминий, за да предизвика както чревна дисбиоза, така и нарушаване на функцията на епифизната жлеза в мозъка [2]. Епифизата произвежда сулфатиран мелатонин и го разпределя в цереброспиналната течност на вентрикулите по време на сън. Предложихме, че важна роля за мелатонина е да доставя сулфат до невроните, за да увеличи доставките на сулфат в HSPG. Хепаран сулфатът играе съществена роля за почистването на клетъчните отломки, което е важен аспект на съня. А нарушението на съня е често срещана характеристика на аутизма [27]. Така че това се приближава до запълване на разликата между дефицита на хепаран сулфат, наблюдаван в мозъка на BTBR мишки, и техните стомашно-чревни нарушения.

6. Таурин: Чудо молекула?

Още преди да позная думата глифозат, публикувах статия, заедно с други колеги, озаглавена: „Енцефалопатията механизъм ли е за подновяване на сулфата при аутизъм?“ [28]. В тази статия обсъдихме решаващата роля на хепаран сулфата в мозъка и потенциалната връзка с аутизма. Предложихме, че тауринът играе централна роля за възстановяване на сулфатните доставки в мозъка при стресови условия. Любопитното е, че човешките клетки не са в състояние да метаболизират таурина, но хранителният таурин може да се превърне в сулфат от чревните микроби. Мозъкът, сърцето и черният дроб съхраняват големи количества таурин и този таурин се освобождава в циркулацията по време на енцефалопатия (подуване на мозъка) или по време на инфаркт. След това този таурин се поема от черния дроб и се конюгира с жлъчните киселини. След това тауринът, получен от деконюгиращите чревни микроби, може да бъде окислен до сулфат, за да се увеличат запасите в кръвта. Подозирам, макар че по това време това е само спекулация, че жлъчните киселини играят решаваща роля за улесняване на реакцията, която освобождава сулфонатната част от таурина, може би чрез закрепване на молекулата на таурина в бактериалната мембрана. По-нататъшното окисление чрез сулфит оксидаза води до получаване на сулфат. Вредното въздействие на глифозата върху бифидобактериите би попречило на производството на сулфат от таурин от чревните микроби, поради нарушение на способността да отделя таурина от жлъчните киселини.

7. Свръхрастеж на клостридии и аутизъм, предизвикан от ваксини

Съвсем различен миши модел на аутизъм включва излагане на бременна мишка язовир на вирусоподобни частици по време на бременността. Две публикации, описващи един такъв експеримент, са спечелили значително внимание от медиите, особено защото демонстрират връзка между определен профил на микробна колонизация на червата в язовира и податливост на аутизъм при малките [7, 8]. Кученцата не само демонстрираха класическо аутистично поведение, но също така имаха “петна от дезорганизирана кортикална цитоархитектура” в определен регион в соматосензорната кора на мозъка им, показвайки нарушено мозъчно развитие в архитектурно отношение.

Авторите отбелязват, че аутистичният профил възниква само ако язовирът има свръхпредставяне на специфичен нишковиден щам Клостридии в червата, което от своя страна води до изразяване на имунен отговор от типа Th17 от имунната система на язовира. Комуникацията между червата и мозъка водеше, забележително, до сигнална каскада, която имаше пряко въздействие върху развиващите се плодове. Вирусоподобните частици, наречени „полиинозинова: полицитидилова киселина“ (poly(I:C)), се инжектират в мозъка на язовира на ембрионалния ден 12.5. Тези частици не са форма на живот, но те заблуждават имунната система на мозъка да вярва, че е имало вирусна инвазия в мозъка и самият имунен отговор, а не вирусната инфекция, предизвиква свръхактивния отговор, влияещ неблагоприятно върху развитието на мозъка в потомството. И това, което е още по-изненадващо, е, че дефектите се развиват при малките мишки, само ако има специално разпределение на чревните микроби, благоприятстващи нишковидните видове Клостридии.

По-ранно проучване, използващо същия модел на мишка за инжектиране на бременна язовир с poly(I:C), свързва свръхрастежа на Клостридии с отделянето на определени специфични токсини и, забележително, свързва тези токсини директно с аутизма [17]. Няколко вида клостридии произвеждат токсични фенолни метаболити като 4-етилфенил сулфат (4EPS) и р-крезол сулфат. Потомството на откритите язовири на мишки показва поразително 45-кратно увеличение на серумните нива от 4EPS, както и повишени нива на р-крезол сулфат. Това е свързано с повишени нива на възпалителни фактори в майчината кръв, плацентата и аминиотичната течност. По-специално, 3-седмично лечение на млади здрави мишки с 4EPS калиеви соли беше достатъчно, за да предизвика аутистични симптоми при тези мишки. Освен това, пробиотичното лечение с вида Бактероиди фрагилис подобрява аутистичните симптоми при потомството на язовири, изложени на poly(I:C).

Тези основни експерименти предполагат, че свръхрастежът на видове Клостридии в червата може потенциално да причини подобен отговор при бременна жена, която получава грипна ваксина. Проучването върху домашните птици, споменато по-рано, показва отчетлива липса на чувствителност към глифозат сред различни видове клостридии. Глифозатът също индуцира пропускаща чревна бариера, вероятно отчасти поради нарушенията на хомеостазата на жлъчните киселини, както се наблюдава в проучването върху мишките BTBR [18], но също и чрез индуцирането на синтез на зонулин в ентероцитите на средното черво, директно предизвикващ отваряне на бариерата [29]. Пропускащата чревна бариера води до пропускаща мозъчна бариера и това би позволило на частиците от ваксиналния грип да получат достъп до мозъка на майката, предизвиквайки възпалителна реакция и в резултат на това сигнална каскада, която променя развитието на плода. Нарушението в мозъка на малките се е случило в соматосензорната кора. Интригуващо е, че развитието на нервни влакна в мозолистото тяло, свързващо соматосензорната кора между двете полукълба, зависи от невронната активност в соматосензорната кора, която може да бъде потисната от някои токсини като тетаничен токсин [30].

8. Човешките изследвания са в съответствие с изследванията върху мишки

Неотдавнашно проучване на Уилям Шоу включваше тризнаци, две момчета и момиче [31]. И на двете момчета е поставена диагноза аутизъм, а момичето е имало припадъци. Установено е, че и трите деца имат високи нива на глифозат в урината си. Те също са имали свръхпредставяне на видове Клостридии в червата, за които се предполага, че допринасят за болестния процес чрез освобождаването им на токсични фенолни метаболити. Друго проучване от 2017 г. върху чревния микробиом на деца с аутизъм с възпалително заболяване на червата в сравнение с нормалните контроли показва намалени видове Блаутия (нарушен метаболизъм на жлъчните киселини) и увеличаване на няколко вида клостридии, които са свързани с намалени нива на триптофан и нарушена серотонинова хомоестаза, свръхекспресия на Th17, всички в съответствие с различните проучвания на модели на мишки [32].

9. Заключение

В обобщение, нарушен чревен микробиом (който може да бъде причинен от глифозат) води до пропусклива чревна бариера, пропусклива мозъчна бариера и пропусклива плацентарна бариера. Това позволява на токсични вещества като алуминий, фенолни съединения и глифозат, както и на живи вируси и ендотоксини от ваксините, да нахлуят в мозъка и, нарушавайки плацентарната бариера, да изложат плода на вреда. Прекалено ревностната имунна реакция към тези обиди нарушава развитието на невроните и причинява аутистично поведение при малките мишки и при деца, чиито майки са били изложени по подобен начин.

Мишките BTBR стават аутисти след много поколения инбридинг по време на излагане на глифозат в лабораторията. Би било много интересно да разберем какво би се случило, ако на група мишки BTBR се осигури органична диета с богата на хранителни вещества и чиста вода и им се позволи да се възпроизвеждат през няколко поколения с тази здравословна диета. Дали потомците в крайна сметка ще загубят своята диагноза аутизъм? Ако го направиха, това би ни разказало много за значението на органичната диета за човешкото здраве и би укрепило значително идеята, че глифозатът е причинителен фактор за аутизма.

Препратки

[1] Swanson N, Leu A, Abrahamson J, Wallet B. Genetically engineered crops, glyphosate and the deterioration of health in the United States of America. Journal of Organic Systems 2014; 9: 6–37.
[2] Seneff S, Swanson N, Li C. Aluminum and Glyphosate Can Synergistically Induce Pineal Gland Pathology: Connection to Gut Dysbiosis and Neurological Disease. Agricultural Sciences 2015; 6: 42–70.
[3] Beecham JE, Seneff S. Is there a link between autism and glyphosate–formulated herbicides? Journal of Autism 2016; 3:1.
[4] Beecham JE, Seneff S. The Possible Link between Autism and Glyphosate Acting as Glycine Mimetic – A Review of Evidence from the Literature with Analysis. J Mol Genet Med 2015; 9:4
[5] McFarlane HG, Kusek GK, Yang M, Phoenix JL, Bolivar VJ, Crawley JN. Autism–like behavioral phenotypes in BTBR T+tf/J mice. Genes Brain Behav. 2008;7(2):152–63. Epub 2007 Jun 7.
[6] Scattoni ML, Ricceri L, Crawley JN. Unusual repertoire of vocalizations in adult BTBR T+tf/J mice during three types of social encounters. Genes Brain Behav 2011; 10:44–56.
[7] Kim S, Kim H, Yim YS, Ha S, Atarashi K, Tan TG, Longman RS, Honda K, Littman DR,, Choi GB, Huh JR. Maternal gut bacteria promote neurodevelopmental abnormalities in mouse offspring. Nature 2017;549: 528–532.
[8] Yim YS, Park A, Berrios J, Lafourcade M, Pascual LM, Soares N, Kim JY, Kim S, Kim H, WSaisman A, Littman DR, Wickersham IR, Harnett MT, Huh JR, Choi GB. Reversing behavioural abnormalities in mice exposed to maternal inflammation. Nature 2017;549: 482–487.
[9] Irie F, Badie–Mahdavi H, Yamaguchi Y. Autism–like socio–communicative deficits and stereotypies in mice lacking heparan sulfate. Proc Natl Acad Sci U S A. 2012 Mar 27; 109(13): 5052–5056.
[10] Dwyer CA, Esko JD. Glycan susceptibility factors in autism spectrum disorders. Mol Aspects Med. 2016;51:104–14.
[11] Frantz C, Stewart KM, Weaver VM The extracellular matrix at a glance. J Cell Sci 2010 123: 4195–4200.
[12] Mercier F. Fractones: extracellular matrix niche controlling stem cell fate and growth factor activity in the brain in health and disease. Cell. Mol. Life Sci. 2016; 73:4661–4674.
[13] Inatani M, Irie F, Plump AS, Tessier–Lavigne M, Yamaguchi Y. Mammalian brain morphogenesis and midline axon guidance require heparan sulfate. Science. 2003;302(5647):1044–6.
[14] Mercier F1 Kwon YC, Douet V. Hippocampus/amygdala alterations, loss of heparan sulfates, fractones and ventricle wall reduction in adult BTBR T+ tf/J mice, animal model for autism. Neurosci Lett. 2012;506(2):208–13.
[15] Deoni SC, Zinkstok JR, Daly E, Ecker C; MRC AIMS Consortium, Williams SC, Murphy DG. White–matter relaxation time and myelin water fraction differences in young adults with autism. Psychol Med. 2015 Mar;45(4):795–805.
[16] Lau YC, Hinkley LB, Bukshpun P, Strominger ZA, Wakahiro ML, Baron–Cohen S, Allison C, Auyeung B, Jeremy RJ, Nagarajan SS, Sherr EH, Marco EJ. Autism traits in individuals with agenesis of the corpus callosum. J Autism Dev Disord. 2013 May;43(5):1106–18.
[17] Hsiao EY, McBride SW, Hsien S, Sharon G, Hyde ER, McCue T, Codelli JA, Chow J, Reisman SE, Petrosino JF, Patterson PH, Mazmanian SK. Microbiota modulate behavioral and physiological abnormalities associated with neurodevelopmental disorders. Cell 2013;155(7):1451–63.
[18] Golubeva AV, Joyce SA, Moloney G, Burokas A, Sherwin E, Arboleya S, Flynn I, Khochanskiy D, Moya–Pérez A, Peterson V, Rea K, Murphy K, Makarova O, Buravkov S, Hyland NP, Stanton C, Clarke G, Gahan CGM, Dinan TG, Cryan JF. Microbiota–related Changes in Bile Acid & Tryptophan Metabolism are Associated with Gastrointestinal Dysfunction in a Mouse Model of Autism. EBioMedicine.2017;;24:166–178.
[19] Samsel A, Seneff S. Glyphosate’s Suppression of Cytochrome P450 Enzymes and Amino Acid Biosynthesis by the Gut Microbiome: Pathways to Modern Diseases. Entropy 2013; 15: 1416–1463.
[20] Hietanen E, Linnainmaa K, Vainio H. Effects of phenoxyherbicides and glyphosate on the hepatic and intestinal biotransformation activities in the rat. Acta. Pharmacol. Toxicol. 1983; 53: 103–112.
[21] Shehata AA, Schrödl W, Aldin AA, Hafez HM, Krüger M. The Effect of Glyphosate on Potential Pathogens and Beneficial Members of Poultry Microbiota in Vitro. Current Microbiology 2013; 66: 350–358.
[22] Ssmsel A, Seneff S. Glyphosate pathways to modern diseases V: Amino acid analogue of glycine in diverse proteins. Journal of Biological Physics and Chemistry 2016;16: 9–46.
[23] Qingli Li,1,2 Mark J Lambrechts,1 Qiuyang Zhang,1 Sen Liu,1 Dongxia Ge,1 Rutie Yin,2 Mingrong Xi,2 and Zongbing You1 Glyphosate and AMPA inhibit cancer cell growth through inhibiting intracellular glycine synthesis. Drug Des Devel Ther. 2013; 7: 635–643.
[24] Fukuda S, Toh H, Hase K, Oshima K, Nakanishi Y, Yoshimura K, Tobe T, Clarke JM, Topping DL, Suzuki T, Taylor TD, Itoh K, Kikuchi J, Morita H, Hattori M, Ohno H. Bifidobacteria can protect from enteropathogenic infection through production of acetate. Nature 2011;469(7331):543–7.
[25] Adams JB, Johansen LJ, Powell LD, Quig D, Rubin RA. Gastrointestinal flora and gastrointestinal status in children with autism – comparisons to typical children and correlation with autism severity. BMC Gastroenterol. 2011 Mar 16;11:22.
[26] AitBaliY,Ba–MhamedS,BennisM.Behavioralandimmunohistochemicalstudyofthe effects of subchronic and chronic exposure to glyphosate in mice. Front. Behav Neurosci 2017; 11: 146.
[27] Devnani PA, Hegde AU. Autism and sleep disorders. J Pediatr Neurosci. 2015 Oct–Dec; 10(4): 304–307.
[28] Seneff S, Lauritzen A, Davidson R, Lentz–Marino L. Is Encephalopathy a Mechanism to Renew Sulfate in Autism? Entropy 2013; 15: 372–406.
[29] Gildea JJ, Roberts DA, Bush Z. Protective Effects of Lignite Extract Supplement on Intestinal Barrier Function in Glyphosate–Mediated Tight Junction Injury. Journal of Clinical Nutrition and Dietetics 2017;3(1):1.
[30] Wang CL, Zhang L, Zhou Y, Zhou J, Yang XJ, Duan SM, Xiong ZQ, Ding YQ. Activity–dependent development of callosal projections in the somatosensory cortex. J Neurosci. 2007;27(42):11334–42.
[31] Shaw W. Elevated Urinary Glyphosate and Clostridia Metabolites With Altered Dopamine Metabolism in Triplets With Autistic Spectrum Disorder or Suspected Seizure Disorder: A Case Study. Integrative Medicine 2017;16(1): 50–57.
[32] Luna RA, Oezguen N, Balderas M, Venkatachalam A, Runge JK et al. Distinct Microbiome–Neuroimmune Signatures Correlate With Functional Abdominal Pain in Children With Autism Spectrum Disorder. Cell Mol Gastroenterol Hepatol. 2017;3(2):218–230.